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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR),簡(jiǎn)稱Q-PCR,是一種在擴(kuò)增反應(yīng)中,以熒光化學(xué)物質(zhì)測(cè)每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物的總量,通過內(nèi)參或者外參法對(duì)待測(cè)樣品中的特定基因序列進(jìn)行定量分析的方法。
內(nèi)參選擇原則
1) 無組織特異性,各組織中表達(dá)無明顯差異;
2) 表達(dá)水平與細(xì)胞周期、活化無關(guān);
3) 表達(dá)不受外源或內(nèi)源因素影響;
4) 表達(dá)量不要太高或太低,中等表達(dá)量為宜;
5) 不存在假基因;
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結(jié)果展示
送樣建議
1) 樣品類型:總RNA或者組織樣;
2) 樣品濃度:≥50ng/μg;
3) RNA總量:≥1μg;
4) RNA純度:OD260/280:1.8-2.0;OD260/230≥1.8,260處有正常峰值;
5) RNA完整度:電泳檢測(cè)28s/18s≥1.5或RIN≥6.3(動(dòng)物)、6.0(植物、真菌),基線平整(軟體等無28S物種)。
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